thermo FastDigest SalI快速內(nèi)切酶貨號FD0644
thermo FastDigest SalI快速內(nèi)切酶貨號FD0644
單位:200U
賽默飛世爾科技近期推出Thermo Scientific Fermentas FastDigest快速酶,是為快速DNA酶切專門研發(fā)的進(jìn)階版限制性內(nèi)切酶。在30年的內(nèi)切酶研究當(dāng)中,我們積累的限制性內(nèi)切酶生產(chǎn)菌株庫是業(yè)內(nèi)zui大的限制性內(nèi)切酶生產(chǎn)菌株庫之一。大量可供選擇的同裂酶和優(yōu)異的生產(chǎn)能力促進(jìn)了這個包含176種FastDigest快酶的*系統(tǒng)的誕生。
所有FastDigest快速酶在通用的FastDigest緩沖液和FastDigest Green綠色緩沖液中都具有100%活性,并可在5-15分鐘內(nèi)迅速完成酶切。這就使得任意限制酶組合都能夠在同一反應(yīng)管中同時反應(yīng),避免了連續(xù)酶切。此外,F(xiàn)astDigest Green綠色緩沖液兼具上樣緩沖液的功能,可直接將反應(yīng)物上樣凝膠電泳,操作更為便利。
FastDigest快速酶可用于酶切質(zhì)粒、基因組DNA、病毒DNA以及PCR產(chǎn)物。酶切時間和實(shí)驗(yàn)方案已經(jīng)過實(shí)驗(yàn)驗(yàn)證,每種快速酶及其作用的模板都有相應(yīng)的酶切時間和實(shí)驗(yàn)方案提供。FastDigest系列尤其適合對于反應(yīng)組分純度、性能穩(wěn)定性和反應(yīng)體系配制簡單化要求*的應(yīng)用。
thermo FastDigest SalI快速內(nèi)切酶貨號FD0644
應(yīng)用
通用緩沖液和直接凝膠上樣
所有FastDigest快酶在FastDigest Green綠色緩沖液中都具有100%活性。此外FastDigest Green綠色緩沖液中還包含密度試劑和兩種示蹤染料,從而可直接將反應(yīng)產(chǎn)物添加到點(diǎn)樣孔中。藍(lán)色染料在1%瓊脂糖凝膠
中的遷移率與3-5kb DNA片段接近, 并在424nm時出現(xiàn)激發(fā)峰;而黃色染料在1%瓊脂糖凝膠中的遷移速度稍快于10bp DNA片段,在615nm時出現(xiàn)激發(fā)峰。
FastDigest Green綠色緩沖液和無色緩沖液一樣可進(jìn)行高性能的DNA酶切和下游應(yīng)用。對于需要用熒光激發(fā)進(jìn)行酶切產(chǎn)物分析的應(yīng)用(例如,在紫外光下測量濃度),我們建議使用無色的FastDigest緩沖液。
FastDigest Green綠色緩沖液
含有FastDigest Green綠色緩沖液的反應(yīng)混合物
A: 電泳前,加入點(diǎn)樣孔中的反應(yīng)混合物;B: 電泳后,在凝膠中得到分離的條帶
用FastDigest快速酶在FastDigest Green綠色緩沖液中5分鐘內(nèi)進(jìn)行質(zhì)粒DNA的三重酶切和連接
M:Thermo Scientific Fermentas GeneRuler Express DNA Ladder (#SM1551)
C:未酶切的質(zhì)粒DNA對照
1:在FastDigest緩沖液中用FastDigest EcoRI、FastDigest KpnI和FastDigest SmaI對質(zhì)粒DNA進(jìn)行三重酶切;2:在FastDigest緩沖液中的酶切和連接反應(yīng)混合物
3:在FastDigest Green綠色緩沖液中用FastDigest EcoRI、FastDigest KpnI和FastDigest SmaI對質(zhì)粒DNA進(jìn)行三重酶切;4:在FastDigest Green綠色緩沖液中的酶切和連接反應(yīng)混合物
5分鐘內(nèi)酶切DNA
用FastDigest酶和傳統(tǒng)內(nèi)切酶進(jìn)行質(zhì)粒DNA酶切的比較
M:GeneRulerTM 1kb Plus DNA Ladder;C:未酶切的質(zhì)粒DNA
1:用FastDigest Xhol 5分鐘內(nèi)酶切質(zhì)粒DNA;2:用FastDigest ApaI 5分鐘內(nèi)酶切質(zhì)粒DNA
3:用FastDigest Xhol和FastDigest ApaI 5分鐘內(nèi)雙酶切質(zhì)粒DNA;4:用Apal酶切質(zhì)粒DNA 1小時
5:用Xhol酶切質(zhì)粒DNA 1小時;6:在1X Tango緩沖液中用4倍的ApaI過量酶切質(zhì)粒DNA 1小時,然后在2X Tango緩沖液中用XhoI再酶切1小時
雙酶切可節(jié)省超過2個小時
FastDigest限制性內(nèi)切酶為DNA酶建立新的標(biāo)準(zhǔn)